河北告急,“抗疫弹药”准备好了吗?

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2021年刚刚开始,国内疫情防控就遇到了一个大挑战:河北5天新增234例,增速之快、病例活动范围之大,一时令人有些惊慌。

7日,进入战时状态的石家庄实行“封城“,全市所有车辆及人员均不出市,火车站实行临时性严防严控措施,所有乘客一律暂停进站乘车。

一瞬间,石家庄仿佛变为一座空城,曾经川流不息的城市街道空空如也。这样的情形,不禁让人想到去年武汉封城初期的情景。

不一样的是,寂静的街道下,全员核酸检测连夜启动。1月6日,河北省卫健委紧急从外地抽调了1000名医务人员到石家庄市;1月9日,河北体育馆网球馆的“火眼”实验室(气膜版)建成投用。截至9日24时,石家庄、邢台两市的第一轮全员核酸检测已经结束,共检测1300余万人,筛查出364例检测阳性。

全员核酸检测的背后,有战时状态迅速有序的动作、专业的医务人员、实用的检测实验室,更有充足的检测试剂来保障1300余万人的核酸检测。对抗疫情反扑的战斗,对检测试剂生产企业及上游原料生产企业的产能和储备都提出了挑战。

盘点国内新冠疫情,从武汉,到吉林、黑龙江、北京新发地、新疆乌鲁木齐、大连、汕尾、青岛、新疆喀什,到今天的石家庄、邢台,病毒展现它狡猾的一面,在全球疫情得以控制之前,我们谁都不能放松警惕,抗疫所用的“弹药”——检测试剂,需要储备充足,时刻警惕疫情反扑。

翌圣是核酸检测原料酶的生产研发企业,其上海总部拥有多个上百升发酵设备和大型纯化设备,武汉分公司武汉翌圣更是全国大型分子酶生产基地,新冠检测原料酶日产量达100万人份。同时备有大量现货库存,随时准备着为抗疫之战提供弹药。

翌圣提供高品质体外诊断原料

一、抑制物耐受型Taq聚合酶

Hieff® Direct Taq DNA Polymerase(5U/μL)(Cat:10709ES)

高纯度:纯度>95%,无核酸酶残留,宿主gDNA残留量低

良好的批次稳定性:严苛的生产流程和质检标准,保证不用批次产品性能稳定性

稳定的生产产能:大规模生产体系,单批次产能达g级;稳定供应,货期短

1、高纯度

图2. 上样量1-5 μL,经SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝染色,Hieff® Direct Taq DNA Polymerase 纯度大于95%。

2、无核酸酶残留

图3. 50 μL反应体系中,加入10U Hieff® Direct Taq DNA Polymerase,与500 ng λ DNA/Hind III酶切产物,在37℃孵育4h,酶切产物带型无变化,无核酸酶残留。3、无切口酶残留

图4. 10μl反应体系,取10U非热启动Taq酶,与500ng IL23R 超螺旋质粒在37℃孵育4h;电泳观察带型变化。结果显示无切口酶残留,表明本品无切口酶残留。

4、磷酸酶残留测试合格

表1. 磷酸酶活性(pNPP,缓冲液)-200 μL的反应缓冲液含1 M二乙醇胺 、0.5 mM MgC12、2.5 mM对硝基苯磷酸盐(pNPP)以及至少40 μL标准Taq(不含Mg2+);通过分光光度法测定并且在37 ℃下4小时可产生

5、热稳定性好

表2. 将待检酶94℃加热30min、60min之后测定酶活。94℃加热1小时仍具有不低于50%的酶活。

6、扩增长度测试合格

图5. 扩增2kb和5kb的片段,电泳检测。

7、大肠杆菌DNA残留检测合格

图6. 50 μL体系中,加入2U的酶,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色。无扩增条带。

二、温度敏感型防污染UDG酶

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile(Cat:10303ES)

10U热敏UDG中大肠杆菌基因组残留低于10拷贝

无核酸酶残留

尿嘧啶是此酶识别的唯一碱基

1、高纯度

图7. 上样量为5-20 μL,经SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝染色,纯度大于95%。

2、无核酸酶残留

图8. 在50μL反应体系,取1U酶,与500ng lambda DNA/Hind III酶切产物在37℃孵育4h;电泳观察带型变化。结果显示带型及条带深浅与对照一致,无核酸酶残留。

3、无切口酶残留

图9. 在10μL反应体系,取1U酶,与500ng IL23R 超螺旋质粒在37℃孵育4h;电泳观察带型变化。结果显示,带型及条带深浅与对照一致,无切口酶残留。

4、无RNase残留

图10. 10μl反应体系,取1U酶,与500 ng 293T RNA 在37℃孵育4h;电泳观察带型变化,与阴性带型一致-合格。

三、第五代逆转录酶

Hifair® V Reverse Transcriptase (Cat:11300ES)

Hifair® V Reverse Transcriptase 是在 Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase 基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与 Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase 相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达 60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的 RNA 模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® VReverse Transcriptase 合成全长 cDNA 的能力也有了提升,可扩增长达 10 kb 的 cDNA。

产品特点

兼容性:适合不同GC含量、不同表达丰度基因逆转录

灵敏度高

1、高纯度

图11. 上样量2 μg,经SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝染色,根据条带分析纯度。纯度大于95%。

2、核酸内切酶残留和核酸外切酶残留

图12.在200 U本酶和1 μg Supercoiled pBR322 DNA,37℃下孵育1 h,结果显示无核酸内切酶残留。在200 U本酶和1 μg λDNA-Hind Ⅲ,37℃下孵育1 h,结果显示DNA的电泳谱带不发生变化,无核酸外切酶残留。

3、无切口酶残留

图13. 在10μl反应体系,取1000U 反转录酶,与500ng IL23R 超螺旋质粒在37℃孵育4h。结果显示电泳观察带型,无变化无切口酶残留。

4、无大肠杆菌基因组残留

图14. 在50 μL体系中,加入200U的酶,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色。结果显示无扩增条带即无大肠杆菌基因组残留。

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公司介绍

翌圣生物科技(上海)有限公司(Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.)成立于2009年,长期专注于分子酶原料及建库试剂盒等产品的研发和生产。我们的目标让下游企业节省更多的成本,为中国精准医疗的发展贡献自己的力量。翌圣生物拥有先进的分子酶双向技术平台、大规模蛋白发酵纯化技术平台、高效抗体筛选技术平台,目前已成功开发各类诊断分子酶、二代测序建库酶等40余种,并实现工业放大。翌圣生物开发的用于基因检测、体外诊断(IVD)相关酶原料获得了广大客户的认可。此外,我们还为工业客户提供定制化开发服务,以满足个性化需求。

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编辑:As素  |  供稿、校对:Ryan |  责编:Elva

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