近年来,细胞治疗领域不断取得新的研究成果,其中,以Car-T疗法近年来日趋火热,竞争激烈。
基于细胞治疗产品的研发规范,安全性评价、有效性和质量可控性等各方面,国家食品药品监督管理总局(CFDA)发布了《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则(试行)》,其中,关于细胞培养环节是否可以使用血清,做了明确指示:“应尽量避免使用任何来源的血清,包括人血清,如必须使用,申请人应提供充分的研究资料,说明在细胞培养过程中使用人血清的必要性。
Biolegend研发了一系列用于T细胞培养的GMP血清替代物, 包括无异源的血清替代物(Cat#420502),及更高安全级别的化学限定非动物源的血清替代物Cat#420506, 适用于原代、激活和基因改造的T细胞培养。
效果展示:支持T细胞的扩增
图1:Cell-Vive™ T-NK Xeno-Free Serum Substitute, GMP 可增强T 细胞的扩增能力,尤其是Naïve T 细胞。PBMC 在anti-CD3/CD28 和IL-2培养的第 4、6、8 天和培养结束(第 11 天)确定细胞数 (A) 和活力 (B)。通过流式细胞术检测 CD62L 和 CD45RO 细胞标记物的表达来确定特定的 T 细胞群比率
效果展示:支持Naïve T细胞的扩增
培养体系:IMDM基础培养基+200IU/ML IL-2
四种培养方式和不同营养成分培养T细胞
10天后不同T细胞的比例
培养方式
Dynabeads,PBMC:培养基中添加偶联CD3,CD28的Dynabeads刺激PBMC
Soluble Ab,PBMC:培养基中添加CD3,CD28抗体刺激PBMC
Crosslinked,PBMC:培养皿包被CD3,CD28抗体刺激PBMC
Crosslinked,CD3T:培养皿包被CD3,CD28抗体刺激纯化后的T细胞
Cell-Vive™ CD Low DMSO Cryopreservation, GMP
▲化学成分限定
▲低浓度DMSO
▲适用于多种来源的T细胞(PBMCs, CD3+, 扩增的T细胞)
▲冻存后维持T细胞的特性
▲批次间稳定
▲GMP级别
效果展示:复苏后D9细胞表面
Marker比例
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