$睿智医药(SZ300149)$ 全球瞩目的2024年美国癌症协会年会（AACR）于4月5日至10日在美国加州的圣地亚哥隆重举行。作为全球最大且历史悠久的科学盛会之一，AACR每年都汇聚了全球顶尖的癌症研究者，展示并探讨关于癌症研究、治疗和预防的最新进展与成果。睿智医药作为一家长期致力于药物研发和癌症治疗的创新型企业，在本次年会上更是有四项重磅研究成果脱颖而出。
四项科研成果
01
新的PROTAC临床前整体药效评估模型及其应用
PROTACs是一类可诱导靶蛋白降解的新型小分子化合物。与通过直接结合使靶蛋白失效的传统抑制剂（占位驱动）不同，PROTAC诱导靶蛋白降解的过程是事件驱动，这意味着单个PROTAC分子可以诱导多个靶蛋白分子的降解。与传统抑制剂相比，这种催化机制使PROTAC能够在较低的浓度下实现对靶蛋白的完全抑制。这也使其成为靶向“不可成药”靶点的一种非常有希望的解决方案。
尽管PROTAC很有前景，但其发展仍面临非常大的挑战。PROTAC的大分子量会导致细胞通透性和生物利用度更差。更重要的是，缺乏用于评估PROTAC效果的高通量定量分析阻碍了PROTAC构效关系（SAR）的研究。靶蛋白-PROTAC-E3的三元复合物的形成，以及后续的对靶蛋白的泛素化的效率，是PROTAC的成功的关键，高效评估这种相互作用以及靶蛋白的泛素化的实验方法对整个PROTAC的发展是至关重要的。
在这张海报中，睿智医药将展示一套用于PROTAC评估的临床前综合模型，包括体外和体内方法。使用低成本、高通量的生化分析，我们可以对PROTAC的药效提供更有价值的见解，促进PROTAC的构效关系（SAR）研究并阐明分子结构和活性之间的关系。然后进行细胞内和体内功能测定，测试PROTAC的药效，PK/PD，以及毒性。这个完整的PROTAC分析方案提供了一个更为强大的工具来加快PROTAC的开发并降低失败率。
Session Category: Experimental and Molecular Therapeutics
Session Title: New Technologies
Session Date and Time: Monday Apr 8, 2024 9:00 AM - 12:30 PM
Location: Poster Section 28
Poster Board Number: 6
Published Abstract Number: 2049
02
利用单B细胞平台发现针对MAGE-A4的类TCR(TCRm) 抗体
抗体疗法在临床上已被证明可以治疗各种类型的癌症，并取得了巨大的成功。传统的治疗性抗体靶向膜蛋白或细胞外分泌蛋白，并且识别位点通常位于蛋白分子表面。而大多数控制细胞生长、增殖和死亡的肿瘤特异
性抗原是细胞内抗原。TCRm 抗体既保留传统抗体的优势，又可以通过识别MHC分子呈递的抗原，使得胞内蛋白或者膜蛋白未暴露区域等有可能成为理想靶点，拓宽传统治疗性抗体的应用空间。TCRm抗体比TCR具有更强的结合亲和力，更容易转化成ADC，BsAbs，CAR-T等优势。但制备高选择性和强效的TCRm仍面临许多挑战。
选择安全有效的靶标对于TCRm十分关键，而理想的抗原靶标首先应具备在肿瘤细胞中特异性高表达的特点。研究发现，MAGE-A4在健康成人组织中的表达仅限于免疫豁免部位。但在肺癌、头颈部鳞状细胞癌、滑膜肉瘤(SS)、卵巢癌、尿路上皮癌和黑色素瘤等多种癌症中广泛表达。另外从MAGE-A4中衍生的十肽GVYDGREHTV(aa 230-239)，可以通过HLA-A*02:01分子呈递至细胞表面，并且引起特定细胞免疫反应。目前靶向这个pMHC分子的Afami-cel TCR-T疗法，也在临床上显示出一定的治疗效果。因此MAGE-A4/ HLA-A*02:01可能是TCRm抗体和肿瘤免疫治疗的潜在靶点。
在本研究中，睿智医药利用单B细胞平台LyTARSTM，快速且有效筛选到了特异性靶向MAGE-A4/ HLA-A*02:01的TCRm抗体。此外，通过Alanine walking实验鉴定这些TCRm分子的表位，找到了有别于benchmark结合表位的TCRm分子。这些分子可以以纳摩尔级别亲和力与单体MAGE-A4/ HLA-A*02:01特异性结合并展现出良好的ADCC效应。
Session Category: Experimental and Molecular Therapeutics
Session Title: Cancer Immunotherapy and Drug Delivery
Session Date and Time: Monday Apr 8, 2024 1:30 PM - 5:00 PM
Location: Poster Section 23
Poster Board Number: 11
Published Abstract Number: 3194
03
利用羊驼免疫噬菌体文库发现交联依赖CD28激动剂单结构域抗体
在免疫激活时，除了T 细胞受体(TCR)-肽/主要组织相容性复合体(MHC)相互作用驱动的第一个信号外，共刺激信号对最佳T细胞激活是必不可少的，缺乏共刺激信号将导致初始T细胞进入无活动力的状态。
CD28‐CD80/CD86通路被广泛认为是T细胞初始激活的最经典和最关键的刺激信号。靶向CD3e的双特异性T细胞衔接器可以激活细胞毒性T细胞，并在临床试验中显示出显著的肿瘤消退。然而，缺乏通过CD28的共刺激信号导致T细胞活化不足和早期衰竭。结合靶向CD3e和CD28抗体的提供了一种有吸引力的方法来最佳地提高T细胞的活性。2006年TeGenero的TGN1412 1期试验后，由于危及生命的细胞因子释放综合征, 开发超级激动剂CD28靶向抗体暂停。与激活T细胞并诱导细胞因子风暴的超级激动剂TGN1412不同，肿瘤靶向抗原和交联依赖性CD28双特异性抗体被认为显示出很少或没有毒性。
在本研究中，我们探索了羊驼免疫噬菌体文库的方法来产生交联依赖性激动剂CD28单结构域抗体，用于双特异性抗体的开发。羊驼依序使用重组人CD28胞外结构域和稳定表达人CD28的293F细胞进行免疫。免疫后的血清样本显示出对CD28的良好免疫反应。在Boost 2和3结束时，收集外周血，并使用VHH特异性引物构建噬菌体展示文库。噬菌体展示文库针对重组CD28 ECD蛋白和过表达CD28的CHOK1细胞进行筛选。经过一轮淘选后，蛋白质淘选和细胞淘选在输出效价和重复序列都显示出强大的富集。
接下来，随机挑选600个克隆，通过与内源性表达CD28的U266B1细胞结合进行筛选。在326个显示与U266B1阳性结合的克隆中，鉴定出79个单一的序列。之后使用周质萃取物透过 ELISA 和 FACS 进行二次筛选，确认了 69 个与 CD28 蛋白和表达 CD28 的细胞结合的单一序列。选择十七个独特的序列用于 VHH-Fc 生产。通过 ELISA并通过流式细胞术与原代 T 细胞结合，所有纯化的 VHH-Fc 均显示出亚纳摩尔亲和力。在功能检测中，三支VHH-Fc仅在Fc交联和存在CD3共刺激的情况下在诱导活化原代T细胞产生IL-2，这些VHH可进一步的双特异性T细胞衔接器的发展。
Session Category: Clinical Research
Session Title: Immunomodulatory Interventions and Mechanisms
Session Date and Time: Monday Apr 8, 2024 9:00 AM - 12:30 PM
Location: Poster Section 42
Poster Board Number: 23
Published Abstract Number: 2479
04
建立KRAS G12C突变脑转移模型，用于前临床评估针对KRAS G12C的靶向抗癌治疗
KRAS在癌症中是最常见的致癌基因之一，尤其在肺癌中。临床研究显示，约有14%的非小细胞肺癌（NSCLC）患者带有KRAS G12C突变，且这些患者中脑转移的发生率相对较高。对于带有KRAS G12C突变的NSCLC患者，约有30%会出现脑转移的情況，由于患者的治疗选择有限且临床效果不佳，使得治疗上更加困难。AMG510（Sotorasib）是一种针对KRAS G12C的小分子抑制剂，已获得FDA批准用于NSCLC治疗。近期的临床研究表明，Sotorasib对KRAS G12C NSCLC脑转移也具有一定的治疗效果。这一结果显示KRAS G12C的靶向药物若能通过BBB(血脑屏障），就能有效抑制脑转移的肿瘤生长，达到一定程度的治疗效果。
为评估AMG510对抑制NSCLC脑转移的抗肿瘤活性，助力相关KRAS靶向药物的开发，睿智医药使用NCI-H358-luc细胞系建立了脑原位（脑转移）模型，包括颅内、颈动脉和左心室注射的转移模型。并利用生物发光成像（BLI）技术用小动物活体成像仪（IVIS)评估了肿瘤生长和转移的发生率。
睿智医药的动物设施是AAALAC/OLOW认证的动物设施，所有动物实验均在经AAALAC认证的设施中进行，符合动物福利法规。我们成功的建立了脑原位（脑转移）模型，并评价了Sotorasib (AMG510）治疗脑转移的药效；初步结果显示，Sotorasib (AMG510）能穿越血脑屏障（BBB）并对KRAS G12C脑转移肿瘤具有明显的治疗效果。这些模型为KRAS G12C抑制剂的研发与药效评价评估提供了强大工具，并可扩展应用于其他与KRAS突变相关的脑转移或抑制剂的研究。
Session Category: Tumor Biology
Session Title: Modeling Cancer in Mice
Session Date and Time: Monday Apr 8, 2024 1:30 PM - 5:00 PM
Location: Poster Section 10
Poster Board Number: 4
Published Abstract Number: 2817