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回复@爱丁堡小闹闹: 我记得看过一篇文章。现在的AAV疗法都没有整合到DNA。 原来是刻意的[很赞]//@爱丁堡小闹闹:回复@Stevevai1983:AAV可以直接改造DNA（嵌入到19号染色体），但是这样会产生伦理问题，等于修改了人类基因组；


所以临床使用的重组AAV实际上是缺陷型的AAV，切掉了“rep”和“cap”，这样就失去了整合到19号染色体的特性。然后结构变成了“启动子”+“转基因”
polyA尾巴: 是成熟mRNA的标志，主要功能是防止合成的mRNA被降解掉；
ITR：是145 bp的反向末端重复序列. 可形成T型的发夹结构，含有DNA复制起始和病毒颗粒包装所需的顺式作用元件。
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引用：
2019-07-07 07:23
A型血友病基因疗法，注射一针，3周后无需再每周注射几次凝血8因子，欧洲皇室曾经因为血友病死了大量子嗣，如今一针解决，惊叹！

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黄建平2019-07-09 11:28

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黄建平2019-07-09 11:27

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爱丁堡小闹闹2019-07-09 11:23

有丝分裂过程中，AAV的DNA不会随之复制分裂。所以AAV游离的DNA只会存在于最初转染的细胞之中，不会稳定的复制。随之开始的细胞的凋亡，AAV也就不起作用了。
Daya S, Berns KI (October 2008). "Gene therapy using adeno-associated virus vectors". Clinical Microbiology Reviews. 21 (4): 583–93.

黄建平2019-07-08 22:34

请教：
1、AAV的质粒在有丝分裂时，会一起进行分裂复制吗？
2、如果AAV不能跟随复制，慢病毒载体把基因整合到人基因组里，会一起分裂复制，是不是意味着慢病毒的有效期比AAV长？

爱丁堡小闹闹2019-07-08 19:33

整合到DNA就变成改造人了嘛....而且是终生不可逆的，会有很多不可预估的风险。即使做动物实验，也是通过重组AAV+REP+CAP的包装质粒（3质粒或者双质粒系统）来实现的。
这一设计让AAV基因组成为稳定的游离DNA（episomal DNA），导致基因组能够在不再进行有丝分裂的细胞中持续进行基因表达（游离，非嵌入19号染色体）。



删除REP, CAP还有2个优点：
1. 可以最大化重组AAV携带转基因的容量，
2. 减小体内递送转基因时产生的免疫原性和细胞毒性。



现在最流行的设计，是把转基因部分设计成自我互补的序列，比如诺华的Zolgensma：
与传统的单链AAV基因组相比，它的基因表达更为迅速，而且表达量更高。